NGHIÊN CỨU TẠO RỄ TƠ IN VITRO CÂY THÀNH NGẠNH (Cratoxylum pruniflorum Kurz) THÔNG QUA VI KHUẨN Agrobacterium rhizogenes

Tóm tắt

Thành ngạnh (Cratoxylum pruniflorum Kurz) thuộc loài cây mọc hoang dại và phổ biến khắp các vùng trên lãnh thổ nước ta, đặc biệt ở các tỉnh miền núi phía Bắc. Chúng được sử dụng để làm thuốc và nước uống khá phổ biến trong phạm vi dân gian. Gần đây các nhà khoa học phát hiện trong dịch chiết của thành ngạnh có chứa nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học như các xanthone trong vỏ và rễ cây, các epigallocatechin gallate và epicatechin gallate trong lá, ngoài ra còn có các tannin, terpenoids và saponins, v.v. có hoạt tính kháng khuẩn, kháng oxy hoá và hoạt tính gây độc đối với các dòng tế bào ung thư. Trong nghiên cứu này, cuống lá in vitro cây thành ngạnh được chuyển gen hình thành rễ tơ thông qua vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes ATCC 15834 với mật độ vi khuẩn 4.104 CFU/mL trong điều kiện bổ sung 100 µM acetosyringone. Thời gian đồng nuôi cấy trong 72 giờ cho tỷ lệ hình thành rễ tơ cao nhất đạt 4,66% trên môi trường SH không bổ sung chất điều hoà sinh trưởng. Hai dòng rễ tơ R1 và R2 được chọn lọc thông qua kỹ thuật PCR, trong đó dòng R2 tăng trưởng tốt trên môi trường lỏng SH với khối lượng tươi đạt 582,08 mg, tăng 2,19 lần so với khối lượng ban đầu nuôi cấy. Kết quả trên là cơ sở cho những nghiên cứu sâu hơn sau này trên cây thành ngạnh.